چکیده :

زمينه و هدف: كمبود پروتامين و آسيب DNA بر ميزان بيان ژن‌ها در دوره‌ي جنيني اثر مهمي دارد. نگهداري اسپرم در محيط كشت موجب تغييرات مورفولوژيك هسته و آزاد شدن DNA مي‌گردد. با وجود اين، ارتباط بين كمبود پروتامين و ميزان آزاد سازي قطعات DNA از اسپرم‌ها‌ي نگهداري شده در محيط كشت و حضور ژن DNMT1 در اين قطعات مشخص نمي‌باشد. روش بررسي: آناليز مايع سيمن طبق معيار WHO انجام شد. جهت تعيين كمبود پروتامين از رنگ‌آميزي CMA3 استفاده گرديد. 20 ميليون اسپرم از هر نمونه در محيط مصرفي Ham’s F10 به مدت 24 ساعت در دماي 37 درجه‌ي سانتي‌گراد انكوبه شد. پس از سانتريفوژ كردن، از فاز سوپرناتانت استخراج DNA صورت گرفت. غلظت DNA توسط بيوفوتومتر تعيين گرديد. حضور ژن DNMT1 توسط انجام PCR با پرايمر‌هاي اختصاصي و الكتروفورز محصولات PCR بر روي ژل آگارز تاييد شد. يافته‌ها: بين ميزان قطعات DNA آزاد شده از اسپرم در محيط كشت و رنگ آميزي CMA3 ارتباط مستقيم و معني‌داري مشاهده گرديد (05/0P < ). بين ميزان قطعات DNA آزاد شده از اسپرم در محيط كشت و حضور ژن DNMT1 ارتباط مستقيم و معني‌داري وجود دارد (05/0P < ). ارتباط معني‌داري بين كمبود پروتامين و حضور ژن DNMT1 در قطعات آزاد شده از اسپرم مشاهده نشد. نتيجه گيري: مطالعه‌ي حاضر بيانگر اين امر است كه انكوباسيون اسپرم‌هاي داراي كمبود پروتامين منجر به آزاد شدن قطعات بيشتري از DNA اسپرم مي‌گردد كه در نهايت سلامت جنين‌هاي حاصل از اين اسپرم‌ها را تحت تاثير قرار مي‌دهد.

کلید واژگان :

پروتامين، کروماتين اسپرم، قطعات DNA



ارزش ریالی : 350000 ریال
دریافت مقاله
با پرداخت الکترونیک