تعيين ژنوتيپ مولكولي گونه هاي اوره آپلاسما در زنان مبتلا به عفونت هاي ژنيتال با روش16S-23S rDNA PCR- RFLP.

مقدمه و هدف: عليرغم روشهاي وسيعي که تاکنون از متدهاي آناليتيکي براي تمايز مايکوپلاسما استفاده شده است، تشخيص مايکوپلاسماها درحد گونه هنوز با مشکل روبرو مي باشد. عموماً قدرت تمايز پائين روشهاي سرولوژي به دليل تغييرات سريع در اندازه و فاز آنتي ژنهاي ايمني غالب موجود در سطح سلولي مايکوپلاسماها، آن را به عنوان يک روش تايپينگ مايکوپلاسماها محدود کرده است. در مقابل روشهاي مولکولي اين مشکلات را ندارند و مي توانند براي تايپينگ مايکوپلاسماها مورد استفاده قرار بگيرند. هدف از اين مطالعه، تعيين ژنوتيپ مولکولي گونه هاي اوره آپلاسما با تکنيک 16S-23S rRNA PCR- RFLP در زنان مبتلا به عفونت هاي ژنيتال بود. روش كار: دراين مطالعه توصيفي ـ مقطعي 210 فرد بيمار مراجعه کننده به درمانگاه زنان و زايمان بيمارستان دانشگاهي حضرت رسول اکرم (ص) تهران در طي سالهاي 88-1387 انتخاب و از هر بيمار نمونه گيري انجام و به آزمايشگاه ارسال شد. براي انجام PCR- RFLP با استفاده از پرايمر اختصاصي جنس اوره آپلاسما براي تکثير نواحي 559bp ژن16S-23S rRNA استفاده گرديد. بعد از انجام PCR و سکانس کردن، نمونه هاي مثبت تحت اثر آنزيم هاي محدودالاثر مختلفي قرار گرفتند. نتايج: از 210 نمونه با PCR، 93 مورد (3/44%) و با کشت 69 نمونه (9/32%) گونه اوره آپلاسما ايزوله گشت. در مطالعه حاضر تنها بيووار 1(اوره آپلاسما پاروم) از نمونه هاي کلينيکي جدا شدند و اين نتايج با استفاده از برش آنزيمي TaqI (آنزيم اختصاصي گونه هاي اوره آپلاسما) تائيد گرديد. هم چنين آناليز نتايج PCR-RFLP و سکانس کردن نمونه هاي اوره آپلاسما نشان داد که همگي از سروار 3 اوره آپلاسما پاروم بودند. نتيجه نهايي: بطورکلي مي توان گفت که اوره آپلاسما پاروم از نمونه اي ژنيتال ايزوله مي گردد و چون در الگوهاي آنزيمي ايزوله هاي اوره آپلاسما تفاوتي مشاهده نشده لذا در بين آنها هتروژنيستي ژنتيکي وجود ندارد و عفونتها در افراد مختلف مي تواند ناشي از انتشار يک سويه تکي يعني بيووار 1 باشد. هم چنين اين مطالعه نشان داد که تکنيک PCR-RFLP يک روش سريع، قابل اجرا و اختصاصي براي جداسازي، شناسائي و تايپينگ ايزوله هاي اوره آپلاسما مي باشد.

اوره آپلاسما اوره آليتيکوم / اوره آپلاسما پاروم / ژنوتايپينگ / واكنش زنجيره اي پليمراز