چکیده :

مقدمه و هدف:هورمون‌های گليکوپروتئينی ترشح‏شده از هيپوفيز قدامی از دو زيرواحد آلفا و بتا با اتصال غيرکوالان تشکيل‏شده‏است، زيرواحد الفا در هورمون‌های اين خانواده يکسان است و تفاوت در فعاليت بيولوژيک اين دسته ازهورمون‌ها به زيرواحد بتای آنها ارتباط‏دارد. با توجه به عدم دسترسی مناسب به هورمون و امکان ايجاد آلودگی، در اين تحقيق تلاش‏شد تا با استفاده از تواليIRES زيرواحدهای آلفا و بتای اين ژن به‏منظور استفاده درمانی، در پلاسميد بيانی pEGFP-N1 کلون شود. مواد و روش‌ها:تحقيق با طراحی تجربی انجام‏گرفت،به‏منظور کلونينگ زيرواحدهای آلفا و بتای هورمون LH، ابتدا توالی نوکلوتيدی طراحي‏شده در پلاسميد حاملpGEM-BIسنتز شد. توالی مورد نظر در سايت SmaI پلاسميدبيانی pEGFP-N1،ساب‏کلون شد. پلاسميد حاصل باانجام هضم آنزيمی و PCR،مورد تأييد قرارگرفت. نتايج:آناليزآنزيميو PCRنشان‏داد که پلاسميد-α-IRES-β pEGFP-Nl، حاوی توالی صحيحی بوده، با توالی ژن مورد نظر در بانک ژن تطابق ‏دارد. نتيجه‏ گيری:اينپلاسميد به دليل ساختار صحيح براي انتقال به سيستم يوکاريوتي وارزيابي بيان، مناسب است.

کلید واژگان :

ساب‏كلونينگ، هورمون LH، وکتور بیان



ارزش ریالی : 600000 ریال
دریافت مقاله
با پرداخت الکترونیک