زمينه و هدف: يکي از راه هاي تقويت اثر واکسن ها استفاده از ياور ها مي باشد. STxB باکتري شيگلا داراي نقش ياوري و حاملي بوده و مي توان با ترکيب کردن آنتي ژن هاي کانديداي واکسن با اين ياور به توليد واکسن مناسب پرداخت. غاسول صابوني گياهي داراي فعاليت ان-گليکوزيداز مي باشد. ايزوفرم 6 اين گياه (SO6)، آدنين 4324 را در توالي حفاظت شده GAGA در 28SrRNA پورين زدايي کرده و سنتز پروتئين را مختل مي کند. هدف اين مطالعه، بيان ژن SO6-STxB در باکتري اشرشيا کلي و بررسي تيتر آنتي بادي آن در موش مي باشد. روش کار: در اين مطالعه تجربي ژن SO6 با جايگاه هاي آنزيمي BamHI و SalI از پلاسميد pUC57 جداسازي گرديد و در وکتور بياني pET28a() حاوي ژن STxB زيرهمسانه سازي و به باکتري اشرشيا کلي سويه BL21(DE3) تراريخت شد. بيان پروتئين نوترکيب SO6-STxB توسط IPTG القا و تخليص به وسيله کروماتوگرافي تمايلي ستون نيکل انجام گرديد. تاييد پروتئين نوترکيب با استفاده از وسترن بلات انجام گرفت. موش ها به صورت صفاقي با پروتئين تخليص شده واکسينه شدند و تيتر IgG سرم به روش ELISA مورد سنجش قرار گرفت. يافته ها: زيرهمسانه سازي ژن STxB-SO6 در وکتور بياني pET28a() به وسيله واکنش PCR و هضم آنزيمي، تائيد شد. پروتئين نوترکيب 5/37 کيلودالتوني توليد شده به وسيله SDS-PAGE و لکه گذاري وسترن تاييد شد. سپس آنتي بادي توليد شده از سرم موش جداسازي و توسط الايزا اندازه گيري گرديد. نتيجه گيري: آنتي ژن STxB-SO6 نوترکيب تخليص شده مي تواند براي تحقيقات ضد سرطاني و کانديد واکسن استفاده شود.
کلید واژگان :STxB-شیگلا-غاسول صابونی-فعالیت- N-glycosidase-SO6
ارزش ریالی : 350000 ریال
با پرداخت الکترونیک