چکیده O157:H7 نوع اصلی (EHEC) باعث بیماری شدید اسهال، اسهال خونی،کولیت هموراژیک ، و نارسایی کلیه حاد می شودو در شیوع شدیدتا 50٪ ازبیماران ممکن است بستری و بین 2 تا 7 درصد از بین بروند. پروتئین کد شده توسط ژن rfbE ، در E. coli O157 که پنجمین ژن خوشه از ژن rfb است ،که در مسیر سنتز لیپوپلی ساکارید (LPS) باکتری ایفای نقش می کند. هدف از انجام این تحقیق شناسایی سویه های اشریشیا کلی EHEC حامل ژن بیماری زای rfbE در غلظت های مختلف اوره است و هدف کاربردی نیز راه اندازی روش های سریع شناسایی ژن بیماری زای rfbE می باشد. مواد و روش ها این آزمایش جهت تشخیص (EHEC) از میان سویه های اشرشیا کلی جدا شده ، یک کلونی تشخیص داده و در درون 15 میلی لیتر از محیط کشت (mTSB) در يک شبانه روز دردماي 37 درجه سانتي گراد کشت داده شدو سپس يک لوپ ازسوسپانسیون فوق 1/0 میلی لیتر در محیط (SMAC-CT) و اوره براث و اوره آگاربا غلظت های 40،8 li O157 از روش PCR استفاده شد. نتایج 0،120 به مدت 24 ساعت در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه می شدند. سپس برای تشخیص ژن rfbE E. co نتایج بدست آمده با استفاده از PCR و RT_ PCR از این پژوهش در بررسی بیان ژن rfbE در EHEC در حضور غلظت های مختلف اوره 40، 120،80 نشان دهنده بیان ژن rfbE می باشد. بحث و نتیجه گیری این پژوهش نشان دهنده این است که هر چه غلظت اوره بیشتر باشد با توجه به میزان کاهش بافر در محیط کشت ها میزان بیان rfbe بیشتر می باشد.
کلید واژگان :E. coli O157 ، EHEC ، ژن rfbE ، اوره
ارزش ریالی : 300000 ریال
با پرداخت الکترونیک